沙門氏菌確認片

Neogen Petrifilm™ 沙門氏菌確認片（原廠牌3M）

      Neogen Petrifilm 沙門氏菌快檢片用於快速檢測食品與食品加工環境中的沙門氏菌。沙門氏菌檢測套組包含 Neogen Petrifilm 沙門氏菌增殖培養基（Enrichment Base）、Neogen Petrifilm 沙門氏菌增殖添加劑（Enrichment Supplement）、Neogen Petrifilm 沙門氏菌快檢片、Neogen Petrifilm 沙門氏菌確認片。 
      Neogen Petrifilm 沙門氏菌快檢片帶給您簡單且高效的檢測體驗，適用於食品與食品加工環境檢體，可幫助您簡化和標準化病原菌檢測過程，同時提供您精確的數據，並縮短操作時間，提升檢測效率 ! 
      Neogen Petrifilm 沙門氏菌確認片可協助您即時進行生化檢測確認結果，一旦快檢片上出現疑似菌落，立即使用確認片，不須挑起菌落轉移至其他瓊脂培養基重新培養即可確認生化檢測結果。 
       傳統沙門氏菌檢驗需配製多種培養基，操作步驟繁雜，Neogen 標準化專用配方不僅簡化流程，同時也改善操作一致性，減少人員誤差。Neogen Petrifilm 沙門氏菌快檢片為即開即用的產品， 檢測前不須配製培養基，方便技術人員使用，大幅改善實驗效率。此外，快檢片效期長達兩年，顯著優於傳統培養基的保存期限。 

          • 增殖培養：41.5°C ± 1°C，18 ~ 24 小時。
          • 菌落培養：41.5°C ± 1°C，24 ± 2 小時。
          • 生化確認培養：41.5°C ± 1°C，4 ~ 5 小時。

          • Neogen Petrifilm 沙門氏菌增殖培養基與 Neogen Petrifilm 沙門氏菌增殖添加劑—為獨特的培養基，可幫助沙門氏菌修復與生長。

          • Neogen Petrifilm 沙門氏菌快檢片—為即開即用的呈色培養基，含有冷水溶凝膠與沙門氏菌選別性培養基。

          • Neogen Petrifilm 沙門氏菌確認片—為一種生化基質，可幫助沙門氏菌之生化確認。

沙門氏菌檢驗的操作步驟：

    增殖流程

在無菌環境下秤取Neogen Petrifilm™沙門氏菌增殖添加劑(0.05g增殖添加劑:1L增殖液)。

在無菌環境下將沙門氏菌增殖添加劑加入已滅菌的Neogen Petrifilm™沙門氏菌增殖培養基中。

準備稀釋樣品。秤取或吸取食物樣品至無菌容器中，如：鐵胃袋或均質袋。

加入固定比例的步驟2增殖液(例如：25g檢體加入225mL增殖液)。

以鐵胃機充分混合均質。

樣品增殖培養: 於41.5±1℃下培養18~24小時。若為低背景值的樣品(<104 CFU/g)，跳至執行步驟9~12後，接續進行步驟13a。

若為高背景值的樣品(>104 CFU/g)，需進行二次增殖，取0.1mL前述已培養18~24小時的增殖液，加入至Rappaport-Vassiliadis R10(R-V R10)中。

將R-V R10增殖培養基於41.5±1℃下培養8~24小時。在執行步驟9~12後，跳至步驟13b。

    水化流程

將Neogen Petrifilm™ 沙門氏菌快檢片置於平坦處，掀起上層膜，使用微量吸管吸取2mL無菌水，垂直滴於底膜中央處。

輕輕地將上層膜向下捲動覆蓋底膜，避免在過程中產生氣泡。

將Neogen Petrifilm™ 壓板置於快檢片中央處，輕輕地按壓壓板，使液體均勻的分佈在圓形培養區域，切勿轉動或滑動壓板。

移除壓板，置於室溫下(20~25℃)至少1小時，避免光線直射，等待培養基凝固。
備註: 已完成水化的快檢片最多於室溫下放置8小時，若超過8小時未執行樣品檢測，須避光冷藏，最多儲藏一週。

    快檢片之培養及判讀

對於低背景值的樣品，使用10μL的無菌接種環沾取經一次增殖的檢液。使用邊緣無鋸齒狀的接種環避免刮破培養基上的凝膠。

對於高背景值的樣品，使用10μL的無菌接種環沾取經二次增殖的R-V R10。使用邊緣無鋸齒狀的接種環，避免刮破培養基上的凝膠。

由上至下，以劃線方式塗抹，使菌落分散生長。

輕輕地將上層膜蓋下，戴著手套輕柔地塗抹，移除培養區域中的氣泡。

於41.5±1℃下培養24±2小時。培養時，透明面朝上，水平放置，堆疊勿超過20片。

如果出現疑似陽性菌落，使用簽字筆圈選至少5個單一的疑似菌落，再用Neogen Petrifilm™ 沙門氏菌確認片進行生化確認。

    生化鑑定

準備一片Neogen Petrifilm™ 沙門氏菌確認片，回溫至室溫。掀起上層膜(上層膜上已標記疑似陽性菌落)，插入確認片，使確認片與凝膠貼合，避免產生氣泡，蓋回上層膜。

輕柔地推平，移除培養區域中的氣泡，並檢查確認片與凝膠有完整接觸。

連同確認片將快檢片置於41.5±1℃下培養4~5小時。

從培養箱中取出，進行結果判讀，僅需判讀已標記之菌落。

菌落計數與判讀：

菌落範例

生化確認結果比較：

傳統瓊脂培養：

Neogen Petrifilm™ 沙門氏菌快檢片套組：